主角尼禄是“教团骑士”成员之一，是一个拥有恶魔之右腕的年轻战士。直至有一日，但丁从蕾蒂口中知道魔剑教团的阴谋后，便突袭教团的总部，屠杀魔剑教团的成员，于是尼禄便跟但丁展开一场激斗，最后尼禄利用他的“恶魔之右腕”成功击退但丁。由于教团的人未知但丁突袭的原因，于是教团骑士团长克雷德（Credo）命令尼禄前往寻找但丁。尼禄离开总部发觉弗杜那已经完全被恶魔侵占，就是这样展开了《鬼泣4》的故事。

　　尼禄拥有全新的战斗能力“Devil Bringer”，可以利用恶魔之力吸取敌人能力，并拥有抓取，特写攻击及反弹（只限小部份的攻击）的能力，大大减低了游戏中的难度。他的大剑“红色皇后”具有类似《鬼武者》系列“一闪”系统类似的功能，在攻击结束的一瞬间“拉油门”（L2键，键盘Q）可以直接蓄力，如果时间把握得当可以直接蓄满3格能量，从而可以搭配出多种EX连续技，熟练掌握后3SS评价易如反掌，游戏的华丽程度更是得到大幅度提升。

　　但丁拥有全新的转换风格系统，按十字键（键盘上的1，2，3，4）不同的方向可以在游戏中随时转换风格，与前作限定在开始游戏前转换风格的功能不同。

　　但丁多了一个新风格：Dark Slayer，是前作中但丁兄长所使用的风格，能够使用阎魔刀的职业—暗黑骑士风格(在第18关卡可获得),可以再按一次处在当前风格的风格建可转换.

　　尼禄（Nero）

　　尼禄拥有着“恶魔之右腕”的强大威力，可以施展被称为“召魔者” （Devil Bringer）的特殊技巧，包括“抓取”将远方的敌人或道具抓取至眼前，搭配武器施展出不间断的连续攻击。他配备的大剑“红色皇后”（Red Queen）是由魔剑教团技术局所开发，具备油门与用来控制剑尖的喷射口，以内藏的推进剂进行喷射加速、积蓄能量施展连续斩击，亦能够装备道具提升大剑的能力。而他的配枪“蓝色玫瑰”（Blue Rose）是尼禄自行改造的 6 发大口径左轮枪，可同时发射 2 颗子弹，透过集气方式施展强力且具有吹飞效果的射击。由于魔剑教团以剑为尊，因此魔剑教团内只有尼禄使用枪械，尼禄拥有魔人化的力量，魔人化后能解放出右手的真正姿态，并且能使用前作中但丁兄长Vergil的阎魔刀，而右手的来源并未有在故事中提及。

　　备注：黑骑士尼禄?安杰罗这个名字曾经于前作《鬼泣》中被提及，暂时并未得知是否与本作的尼禄有关。

　　备注2：亦有人推测尼禄的右手是Vergil（《鬼泣3》中曾经出现）的一部份（魔人化后的右手），因为在一段情节中提及尼禄得到右手时曾说过Vergil的名句：给我，给我多一点力量!

　　但丁（Dante）

　　但丁继续以最强鬼泣的姿态出现，在蕾蒂口中得知魔剑教团正在策划一连串阴谋，所以突袭魔剑教团总部，前期他会成为新主角尼禄的敌人，直至后期尼禄发现魔剑教团的阴谋后间接与但丁联手阻止教团莫大的阴谋，本集但丁将会配备三件近战武器，包括在上集中他使用的大剑Rebellion，是拥有魔力的剑，拳套Gilgamesh（与上集的BEOWULF有点相似），Gilgamesh拥有惊人的破坏力，是由生物同化一部钢化的魔界金属造成，Gilgamesh同时拥有强力的冲击出力，从蓄积当中可生出极大的威力，他亦配备了新武器Lucifer，在武器中拥有藏有无尽能够爆发的剑的装置，从装置放出来的剑拥有空间固定功能，亦可以控制爆发的时间，是一件战略性很高的武器，除了近战武器，但丁还配备了3件远战武器，包括前几辑的双枪 Ebony&Ivory，散弹枪Coyote-A，以及魔界兵器Pandora，Pandora拥有666种变化，并且拥有变强的破坏力，而射击范围大至能够把周围的敌人一瞬歼灭。

　　姬莉叶（Kyrie）